Антибиотики и антимикробная терапия


Определение резистентности Mycoplasma pneumoniae к макролидам с помощью ПЦР в режиме реального времени и анализа точечных мутаций с высоким разрешением
Дата: 2008-08-25 09:10:00
Тема: Антибиотикорезистентность


Mycoplasma pneumoniae является значимым возбудителем внебольничной пневмонии, которая часто лечится эмпирически. Недавно в популяции были обнаружены штаммы, резистентные к макролидам. Выявление таких штаммов обычно является трудоёмкой и длительной процедурой. В данном исследовании предложен новый, более быстрый, но такой же точный метод выявления резистентных микроорганизмов. Этот анализ можно будет использовать для определения чувствительности к антибиотикам и у других возбудителей инфекционных заболеваний.

Mycoplasma pneumoniae является значимым возбудителем внебольничной пневмонии, которая часто лечится эмпирически макролидами или азалидами, такими как эритромицин или азитромицин. В недавних исследованиях было установлено существование в популяции штаммов, резистентных к макролидам. Мутации были обнаружены в V домене 23S-рибосомальной РНК. В настоящее время определение таких резистентных штаммов требует много времени и выполнения трудоёмких манипуляций, таких как анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов, определение МПК и секвенирование.

В данном исследовании сообщается, что с помощью ПЦР в режиме реального времени можно определить мутации A2063G или A2064G (нумерация у E. coli — A2058G или A2059G), отвечающие за резистентность к макролидам. Анализ точечных мутаций с высоким разрешением в целевых участках V домена 23S-рибосомальной РНК позволяет быстро отделить резистентные к макролидам штаммы от чувствительных. С использованием этого метода было исследовано 100 клинических штаммов и обнаружено пять мутирующих штаммов в сторону усиления резистентности. Эти сведения соответствовали данным, полученным с помощью секвенирования и определения МПК.

Данный метод диагностики был также успешно использован для обнаружения генотипов чувствительных и резистентных штаммов, полученных от 23 пациентов. ПЦР-тест в режиме реального времени материалов, полученных от этих пациентов, на присутствие M. pneumoniae был положительным, хотя бактерии не были выделены из культуры. В этом исследовании впервые сообщается о возможности использования ПЦР в режиме реального времени для определения основных мутаций, обеспечивающих появление резистентности M. pneumoniae к макролидам, а также для выявления резистентности у других возбудителей инфекций. Такой метод диагностики может также позволить клиницистам быстрее подобрать соответствующую антимикробную терапию и обеспечить удобный механизм надзора над генетическими мутациями, которые обеспечивают антибиотикорезистентность.


Wolff BJ, Thacker WL, Schwartz SB, Winchell JM.

Detection of Macrolide Resistance in Mycoplasma pneumoniae by Real-Time PCR and High Resolution Melt Analysis

Antimicrob. Agents Chemother. 2008 Jul 21: AAC.00582-08v1.



Эта статья опубликована на сайте Антибиотики и антимикробная терапия
http://resistance.ru/

URL этой статьи: http://resistance.ru/index.php?article=1720